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重磅綜述丨Cell Host Microbe腸道菌群與色氨酸代謝
腸道是一個(gè)復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)，擁有密集且多樣的微生物群體，我們稱之為腸道菌群，與宿主共同演化產(chǎn)生共生關(guān)系。腸道菌群對(duì)宿主的生理功能有十分重要的影響，比如代謝與營(yíng)養(yǎng)穩(wěn)態(tài)、免疫系統(tǒng)成熟與激活甚至腦活動(dòng)。這些影響大部分是通過(guò)代謝物實(shí)現(xiàn)的，它們或由菌群產(chǎn)生，或來(lái)源于環(huán)境和宿主分子的轉(zhuǎn)化。色氨酸就是腸道微生物與宿主相互影響的代謝物之一。來(lái)自法國(guó)國(guó)家農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院的科學(xué)家Allison Agus、Julien Planchais和Harry Sokol，于2018年6月共同在Cell Host & Microbe發(fā)表綜述文章，文章標(biāo)題為“Gut Microbiota Regulation of Tryptophan Metabolism in Health and Disease”，總結(jié)了腸道菌群在色氨酸代謝過(guò)程中扮演的重要角色，尤其關(guān)注其對(duì)生理和疾病的影響；另外，除了直接將色氨酸轉(zhuǎn)化為生物活性分子，作者還討論了腸道菌群在腸道中對(duì)宿主色氨酸代謝的調(diào)控。原文鏈接：https://doi.org/10.1016/j.chom.2018.05.003。
1.色氨酸的來(lái)源與產(chǎn)生
色氨酸是芳香族必需氨基酸，在20種常見(jiàn)氨基酸中，色氨酸是分子量最大的，但在蛋白質(zhì)組成和細(xì)胞中，色氨酸卻是含量最低的氨基酸，同時(shí)也是很多微生物和宿主代謝物的生物合成前體。早在一個(gè)世紀(jì)前，人們就知曉了某些細(xì)菌（比如大腸桿菌）可以產(chǎn)生色氨酸，并且在工業(yè)生產(chǎn)中進(jìn)行大量應(yīng)用，但細(xì)菌產(chǎn)生的色氨酸對(duì)人體生理的影響并未得到論證。由于動(dòng)物細(xì)胞不能合成色氨酸，人體主要依賴外源的食物攝入。色氨酸的常見(jiàn)食物來(lái)源包括燕麥、香蕉、梅干、牛奶、金槍魚(yú)、奶酪、面包、禽肉、花生和巧克力。世界健康組織推薦色氨酸的攝入量是每天每公斤體重4 mg，目前未發(fā)現(xiàn)過(guò)量攝入色氨酸產(chǎn)生的不利影響。
2.腸道色氨酸代謝通路及生理功能
胃腸道中主要有三條色氨酸代謝通路（圖1）。
2.1吲哚途徑
腸道微生物可以將色氨酸直接轉(zhuǎn)化為包括芳烴受體（AhR）配體在內(nèi)的一些分子，比如吲哚及其衍生物，包括吲哚甲醛（IAld）、吲哚乙酸（IAA）、吲哚丙酸（IPA）、吲哚乙醛（IAAld）和吲哚丙烯酸等。AhR信號(hào)是屏障處免疫應(yīng)答的重要組成部分，通過(guò)促進(jìn)上皮細(xì)胞恢復(fù)、保持屏障完整性以及一些免疫細(xì)胞的功能來(lái)維持腸道穩(wěn)態(tài)。AhR可以直接被食物中的分子和外源性物質(zhì)激活。然而，微生物代謝對(duì)腸道AhR活性有重要影響。事實(shí)上，無(wú)菌或生態(tài)失調(diào)的小鼠腸道是缺乏AhR激動(dòng)劑的。目前的研究只描述了少數(shù)幾種可以產(chǎn)生AhR配體的共生菌，比如乳桿菌屬。色氨酸代謝通路存在于一些人體腸道細(xì)菌中，比如產(chǎn)芽胞梭狀芽胞桿菌可以脫去色氨酸的羧基，產(chǎn)生神經(jīng)遞質(zhì)色胺，該菌種的氧化還原通路還能夠生成IAA和IPA，從而影響腸道通透性以及宿主免疫。大腸桿菌和乳酸桿菌還表達(dá)色氨酸酶，將色氨酸轉(zhuǎn)化為吲哚，然而，吲哚進(jìn)一步加工涉及的酶催化通路，以及在其他共生菌種中的活性，還尚未知曉。另外，吲哚也是菌種間的信號(hào)分子，能夠控制包括抗生素耐藥性、孢子形成和菌膜形成在內(nèi)的細(xì)菌生理過(guò)程。但是，這些復(fù)雜的現(xiàn)象在腸道系統(tǒng)中重要性仍有待研究。
圖1.腸道菌群調(diào)控的色氨酸代謝
2.2犬尿氨酸途徑
在免疫細(xì)胞和上皮細(xì)胞中，色氨酸通過(guò)吲哚胺2，3雙加氧酶（IDO）1進(jìn)入KP，并生成犬尿氨酸（Kyn）及其下游產(chǎn)物，比如喹啉酸（QA）、煙酸、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸和犬尿酸（Kna）。有研究證明腸道菌群對(duì)激活I(lǐng)DO1具有重要作用。KP末端代謝產(chǎn)物有可能參與了一系列宿主生物過(guò)程的調(diào)控，包括神經(jīng)傳遞、炎癥反應(yīng)及免疫應(yīng)答。Kna具有保護(hù)粘膜和調(diào)控免疫的作用，其功能的發(fā)揮很有可能是通過(guò)上皮細(xì)胞和免疫細(xì)胞中表達(dá)的G蛋白偶聯(lián)受體GPR35實(shí)現(xiàn)的。另外，一些腸道細(xì)菌也可以編碼與真核生物KP同源的酶，產(chǎn)生Kyn和下游代謝物，比如具有神經(jīng)毒性的3-羥基氨基苯甲酸。
2.3血清素途徑
神經(jīng)遞質(zhì)5-羥色胺（5-HT）在腦組織內(nèi)由色氨酸羥化酶2（TpH2）生成，但是身體內(nèi)超過(guò)90%的5-HT是在腸道中由TpH1產(chǎn)生的。在生理?xiàng)l件下，外周環(huán)境中的5-HT并不能透過(guò)血腦屏障，而是通過(guò)激活特異性的5-HT受體在腸道中發(fā)揮重要的功能。比如，5-HT可以將信號(hào)從腸道傳遞至內(nèi)源或外源神經(jīng)元處，影響腸道運(yùn)動(dòng)、分泌、血管舒張以及對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。在小腸上皮細(xì)胞頂端和底端表達(dá)的血清素選擇性重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（SERT，由SLC6A4基因編碼）可以將間隙中的5-HT移除，該局部調(diào)節(jié)5-HT濃度的分子也負(fù)責(zé)5-HT在大腦中的重吸收。腸道菌群在腸道5-HT的生成中扮演重要角色，但其機(jī)制尚未完全知曉。另外，一些次級(jí)膽汁酸，比如膽酸鹽的微生物轉(zhuǎn)化產(chǎn)物脫氧膽酸鹽，也可以刺激5-HT的生物合成。
圖2.色氨酸通過(guò)5-HT、Kyn和Indole/AhR途徑的代謝
3.色氨酸代謝的干擾
過(guò)去幾十年的研究表明，腸道菌群與西方生活方式有關(guān)的疾病息息相關(guān)，比如炎性腸�。↖BD）、腸易激綜合征（IBS）、代謝綜合征及并發(fā)癥以及神經(jīng)精神病特征。這些疾病中的很多都受到了色氨酸末端代謝產(chǎn)物的影響，說(shuō)明腸道菌群的作用至少部分是通過(guò)色氨酸代謝缺陷實(shí)現(xiàn)的。
3.1 IBD和腸道免疫
科學(xué)家最近發(fā)現(xiàn)，IBD病人受遺傳因素的影響，體內(nèi)微生物群產(chǎn)生的AhR配體數(shù)量減少，而AhR在腸道組織中的表達(dá)與健康人群相比也有所下降。另外，潰瘍性結(jié)腸炎病人的血清IPA水平降低。IDO1的過(guò)度激活在腸道和整個(gè)系統(tǒng)中均有出現(xiàn)，極有可能是免疫系統(tǒng)激活的表現(xiàn)。支持性證據(jù)有：1）IDO1在IBD活躍病人的體內(nèi)活性更高；2）血清中色氨酸的水平與炎癥應(yīng)答生物標(biāo)志物——C反應(yīng)蛋白的水平呈負(fù)相關(guān)。5-HT途徑在IBD中的狀態(tài)是有爭(zhēng)議的，限速酶TpH1的表達(dá)上調(diào)和腸道5-HT水平的上升在克羅恩病中是有報(bào)道的，但大部分針對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎的研究發(fā)現(xiàn)了相反的結(jié)果。
色氨酸代謝的改變?cè)贗BD病理中有重要意義。在小鼠中，AhR缺陷增加了由T細(xì)胞轉(zhuǎn)移或葡聚糖硫酸鈉（DSS）誘導(dǎo)的結(jié)腸炎的嚴(yán)重程度。研究表明，IBD易感基因Card9缺失的小鼠，其腸道菌群的失調(diào)使得色氨酸無(wú)法轉(zhuǎn)變?yōu)锳hR配體，導(dǎo)致細(xì)胞因子IL-22的釋放減弱，增加DSS誘導(dǎo)產(chǎn)生結(jié)腸炎的概率。在人體中，AhR的藥物激活也可以降低促炎細(xì)胞因子IFNγ的生成，并促進(jìn)IBD病人固有膜單核細(xì)胞中IL-22的產(chǎn)生。另外，與潰瘍性結(jié)腸炎病人類似，DSS誘導(dǎo)結(jié)腸炎的小鼠血清中，IPA和吲哚的水平有所下降，然而，口服IPA能起到一定的保護(hù)作用。
KP的改變也有可能是IBD病理機(jī)制之一。IDO1的缺陷可以導(dǎo)致促炎細(xì)胞因子的激活和結(jié)腸中CD4+ Foxp3+調(diào)控的T細(xì)胞數(shù)量減少，具體的機(jī)制和涉及到的代謝物暫不清楚。Kyn是眾所周知的AhR激動(dòng)劑，但是，在肝癌細(xì)胞中，激活A(yù)hR所需的濃度讓人們開(kāi)始懷疑Kyn在生理?xiàng)l件下激活A(yù)hR的可能性。IBD中菌群失調(diào)的信號(hào)可能會(huì)使KP偏離正常軌道。
3.2腸易激綜合征IBS
盡管我們對(duì)IBS的病因還知之甚少，但至少對(duì)于部分病人來(lái)說(shuō)，腸道菌群的失調(diào)非常有可能是原因之一，色氨酸代謝的削弱也可能與之有關(guān)聯(lián)。IBS病人血清中的Kyn水平下降，且外周IDO1的活性與IBS嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。IBS特點(diǎn)之一——腸道運(yùn)動(dòng)性的改變與5-HT的代謝障礙有關(guān)。與健康人相比，IBS病人直腸活檢切片中TpH1和SERT的表達(dá)量下降。另外，5-HT在結(jié)腸中的含量降低，而在以便秘和腹瀉為主的IBS中升高。5-HT受體的多樣性決定了其在不同器官發(fā)揮特定的功能。在腸道中5-HT3和5-HT4亞型表達(dá)最為豐富，將5-HT與內(nèi)臟痛覺(jué)和運(yùn)動(dòng)障礙聯(lián)系起來(lái)。5-HT3受體拮抗劑和5-HT4受體激活劑分別對(duì)腹瀉和便秘為主的IBS有一定療效。另外，腸道菌群導(dǎo)致的中樞系統(tǒng)的血清素功能異常也可以參與IBS的病理過(guò)程。
3.3代謝綜合征和肥胖
在代謝綜合征病人中，IDO1過(guò)渡激活，血清Kyn水平升高，Kyn/Trp比值與肥胖、代謝綜合征、BMI和甘油三酯成正相關(guān)。肥胖病人的脂肪組織中，IDO1和KP下游酶（KYNU、KAT和KMO）（圖2）均表達(dá)上調(diào)。但是，代謝綜合征病人血液中5-HT水平降低，并與BMI和體脂含量呈負(fù)相關(guān)。腸道菌群參與色氨酸代謝生成的吲哚衍生物有可能參與代謝綜合征的病理過(guò)程。
腦組織中產(chǎn)生的血清素可以誘導(dǎo)飽腹感，但是腸道中產(chǎn)生的5-HT不能透過(guò)血腦屏障。而色氨酸和5-HTP卻可以通過(guò)血腦屏障從而間接影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的5-HT生成和功能。另外，外周的5-HT可以繞過(guò)中樞效應(yīng)來(lái)誘導(dǎo)飽腹感從而調(diào)控宿主代謝。
3.4感染性疾病
色氨酸代謝生成的AhR激活劑IAId對(duì)真菌感染導(dǎo)致的粘膜念珠菌病具有保護(hù)作用，Cyp1A1紊亂導(dǎo)致的AhR配體降解和AhR敲除會(huì)導(dǎo)致對(duì)酸桿菌易感性增加。這些結(jié)果表明色氨酸代謝的平衡在腸道穩(wěn)態(tài)和感染應(yīng)答中的重要作用。除了生成AhR配體，色氨酸代謝是宿主和微生物相互作用調(diào)控的重要部分。
3.5神經(jīng)精神疾病
腸道菌群影響大腦，可能與神經(jīng)精神疾病相關(guān)，潛在的機(jī)制之一就是調(diào)控色氨酸的穩(wěn)態(tài)。色氨酸和Kyn可以通過(guò)血腦屏障，對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)的代謝具有重大影響。腦組織使用色氨酸或者Kyn生成的Kna和QA通過(guò)作用于谷氨酸受體影響腦化學(xué)，對(duì)記憶功能至關(guān)重要。Kan和QA可以分別降低或升高細(xì)胞外谷氨酸水平，這與焦慮和應(yīng)激相關(guān)疾病相關(guān)。最近研究表明自閉癥譜系障礙（ASD）也與腸道菌群相關(guān)，ASD病人血液和尿液中色氨酸降低，IDO1活性升高，血液中5-HT水平升高。
實(shí)驗(yàn)研究表明自閉癥模型小鼠的腸道粘膜5-HT降低50%，5-HT水平與小腸轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間和腸道中某些菌群的豐度有一定的相關(guān)性。除了5-HT，其他色氨酸代謝途徑也可能參與自閉癥的形成。KP代謝物皮考琳酸是一種神經(jīng)保護(hù)性代謝物，其在ASD病人內(nèi)的水平是降低的。另外，AhR信號(hào)通路也可能參與其中，因?yàn)锳hR核內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的基因多態(tài)性與ASD的嚴(yán)重程度相關(guān)。
近來(lái)研究表明微生物-腸-腦軸也參與抑郁的形成。腦內(nèi)5-HT缺乏是抑郁的重要病理特征。當(dāng)IDO1途徑過(guò)度激活時(shí)，色氨酸會(huì)被用于大量生成Kyn，導(dǎo)致腦組織內(nèi)色氨酸缺乏，5-HT合成減少，最后導(dǎo)致抑郁。飲食攝入色氨酸過(guò)少時(shí)也會(huì)導(dǎo)致抑郁，進(jìn)一步支持了色氨酸缺乏在抑郁中的重要作用
圖3.色氨酸代謝在疾病中的改變
4.色氨酸代謝：從平衡紊亂到臨床機(jī)遇
由于色氨酸代謝在病理?xiàng)l件下受到影響，因此色氨酸和其代謝物作為生物標(biāo)志物用于輔助診斷、預(yù)后和選擇治療手段非常具有吸引力。比如，血漿中色氨酸和Kna水平預(yù)測(cè)急性心肌梗死病人的心血管不良事件。此方法可以擴(kuò)展應(yīng)用到其他相關(guān)疾病。
除了作為生物標(biāo)志物，色氨酸代謝物的生物學(xué)效應(yīng)和其在疾病中發(fā)生的改變表明它們可以作為治療的靶點(diǎn)。這可以通過(guò)使用色氨酸代謝物或者靶向他們的受體，亦或者間接通過(guò)改變腸道菌群來(lái)實(shí)現(xiàn)。
當(dāng)IDO過(guò)度激活時(shí)，腸道內(nèi)可利用色氨酸的減少可能導(dǎo)致腸道菌群產(chǎn)生的AhR激活劑降低。飲食添加色氨酸可以減輕DSS誘導(dǎo)小鼠結(jié)腸炎的癥狀，其機(jī)制主要是通過(guò)腸道菌群恢復(fù)AhR配體的生成。同樣的方法可以應(yīng)用于其他炎癥，比如多發(fā)性硬化，其血液中AhR激動(dòng)劑水平降低。在小鼠腦脊髓炎模型中，色氨酸或者色氨酸衍生的AhR激動(dòng)劑可以增強(qiáng)IFN的抑制效應(yīng)，來(lái)限制中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥的發(fā)展。最近一項(xiàng)研究表明吲哚硫酸鹽在腎臟疾病中的功能也可能是治療靶點(diǎn)。通過(guò)基于腸道菌群的方法調(diào)控IDO1和5-HT途徑非常有前景，但是對(duì)相關(guān)微生物和機(jī)制的認(rèn)知還有待于深入研究。
直至目前，大部分色氨酸代謝微生物和其相關(guān)生化途徑仍有待深入研究。其研究的難點(diǎn)包括色氨酸衍生生物活性分子的多樣性、參與轉(zhuǎn)化的微生物的多樣性以及微生物和宿主代謝途徑的部分重合。持續(xù)發(fā)展的高靈敏度和高通量方法有望解決上述難題。不同方法的有機(jī)結(jié)合，比如代謝組學(xué)與宏基因組學(xué)和宏轉(zhuǎn)錄組學(xué)的結(jié)合，看起來(lái)非常有可能鑒定參與色氨酸代謝的微生物和微生物基因。一旦鑒定出來(lái)，就可以使用天然微生物、基因工程菌或者微生物產(chǎn)物調(diào)節(jié)色氨酸代謝來(lái)治療疾病。類似的干預(yù)方法可以單獨(dú)使用，亦可以與其他方法結(jié)合使用。
5.結(jié)語(yǔ)
色氨酸代謝在生理和病理生理過(guò)程中均發(fā)揮重要的作用。上述的主要途徑，尤其是5-HT、Kyn和AhR途徑，在疾病中受到不同的影響，但是又緊密相連。另外，腸道色氨酸代謝還受腸道菌群調(diào)控（圖3）。因此，從治療角度來(lái)看，靶向相關(guān)代謝途徑的小分子、利用操縱色氨酸代謝的微生物和益生菌都是調(diào)控腸道色氨酸代謝可行的方法。但是，由于腸道菌群和宿主相互作用以及研究疾病和模型的復(fù)雜性，科學(xué)家們迫切需要進(jìn)一步的深入研究來(lái)細(xì)化干預(yù)靶點(diǎn)和治療措施。
